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細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品

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DAPI染色液(5 mg/mL) DAPI Stain Solution (5 mg/mL)

發(fā)布者:  發(fā)布時(shí)間:2022-05-07 19:44:09

DAPI染色液(5 mg/mL)

DAPI Stain Solution (5 mg/mL)

產(chǎn)品貨號(hào)JY06013  規(guī)格5 mg/mL×0.2 mL   銷(xiāo)售價(jià)格200

DAPI染色液(5 mg-mL)說(shuō)明書(shū).pdf


產(chǎn)品簡(jiǎn)介

DAPI,即4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽,4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride,也稱DAPI dihydrochloride,分子式為C16H15N5·2HCl,分子量為350.25CAS號(hào)28718-90-3。

DAPI是一種常用的可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光核酸染料,和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比自身強(qiáng)20多倍的熒光。和EBethidium bromide)相比,DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI的更大激發(fā)波長(zhǎng)為340 nm,更大發(fā)射波長(zhǎng)為488 nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,更大激發(fā)波長(zhǎng)為358 nm,更大發(fā)射波長(zhǎng)為461 nm。DAPI也可對(duì)RNA進(jìn)行染色,染色機(jī)理是其可以選擇性嵌入“AU序列并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA (Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長(zhǎng)的更大發(fā)射波長(zhǎng)(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA20%。盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但可以通過(guò)提高濃度使之進(jìn)入活細(xì)胞。

DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來(lái)檢測(cè)酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI典型的藍(lán)色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細(xì)胞生物學(xué)多色熒光標(biāo)記技術(shù),因此也常作為核酸和染色體的復(fù)染劑用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測(cè)等領(lǐng)域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

本產(chǎn)品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產(chǎn)品可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。5 mg/mL DAPI需稀釋后使用。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的DAPI工作濃度為0.5-10 μg/mL。

保存條件

冰袋運(yùn)輸,-20oC避光保存,至少1年有效。

注意事項(xiàng)

1DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2.熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。

3.為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4.低濃度的DAPI不容易穿透細(xì)胞膜。

5.本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

6.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說(shuō)明

對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行DAPI染色。

1配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL)。

2.對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。

對(duì)于懸浮細(xì)胞:至少加入樣本體積3倍的染色液,混勻。

3.室溫放置3-5 min

4.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5 min。

5.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。





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